Jump to content
  • sanniesshop-banner.gif.d86ea02547aa126c899b25f607244aaf.gif sanniesseeds instagram

whazzup

Tissue Culture

Recommended Posts

Ben je al van start??? :verrygood

 

Dampende groet,

 

WOrm

Share this post


Link to post
Share on other sites

Sorry worm,

 

Was even vertraging in gekomen.

 

Ik wou vooraf DVD zien. Omdat ze de inhoud van het pakket aangepast hebben.

 

Deze komt dus niet meer geheel over een met wat in de handleiding staat.

 

Moest het helaas ff verplaatsen naar Donderdag. I.v.b met verplichtingen van vandaag.

 

 

En morgen natuurlijk horti fair.

Share this post


Link to post
Share on other sites
wat voor plantmateriaal ga je gebruiken?

 

Weefselkweek werkplan

We gaan bij deze experiment proberen om callus op te kweken van bijv. de petiole (nerve) van de

cannabisplant. Dit omdat bij eerdere onderzoeken is geconcludeerd dat dit de hoogste callus yield

oplevert.

 

Mogelijke explant bronnen zoals:

  • petiole
  • bloemknop
  • oksel
  • blad
  • shoot apicale meristem (bevat stamcellen), dit zijn primordia van organen zoals de bloem en
    blad
  • florale meristem, ontstaat door een conversie van shoot apicale meristem, onder invloed van een
    koudere temperatuur (volgens de literatuur: een paar dagen tussen 0 en 10 graden) en minstens
    8,5 uur donker per etmaal. Dit zorgt dat de explant wordt aangezet tot bloe en dus zich
    concentreert op bloemen.

 

Medium

Bereiding moet ik nog uit typen

 

Verdeel de medium over de petrischaaltjes. Om ervoor te zorgen dat het 100% steriel is moeten de

schaaltjes nu in een autoclaaf worden behandeld op 121 graden en 15 minuten, volgens eerdere

onderzoeken. Omdat we dit niet kunnen doen, gebruiken we een snelkookpan.

 

Procedure

  • Neem een explant
  • Zet ze in bleekoplossing voor 10 minuten (10% huishoudelijk) om de oppervlak te steriliseren
  • Desinfecteer de werktafel
  • Vul drie bakjes met gedistilleerd water
  • Dompel het pincet in 70% alcohol, steriliseer het door het eventjes boven vuur te houden en dus
    de alcohol eraf te branden, laat het afkoelen en gebruik het vervolgens om de explantjes van de
    bleekoplossing te pakken en in elk van de drie bakjes met schoon water te reinigen. Je hebt dus
    drie 'washes'.
  • Steriliseer ook het mesje met de vlam, laat het afkoelen en gebruik het om de randjes van de
    explant tot 1 mm eraf te snijden, aangezien dit deel dood is gegaan in de bleekoplossing door
    het direct contact.
  • Gebruik het pincet om een explantje in de groeimedium te plaatsen. Druk het heel licht in het medium.
  • Zet de kweekbakjes in een warme en goed belichte lokatie. In geval van contaminatie zijn
    micro-organisme kolonieen binnen een week te zien.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Vette topic Tissue T.

 

Ik zag dat plaatje van die gammakast met ingebouwde tl balken.

laat ik dat idee nou net ook in mijn hoofd hebben.

 

ga dit zeker volgen. :lol:

 

gtrz low

Share this post


Link to post
Share on other sites
Ik zag dat plaatje van die gammakast met ingebouwde tl balken.

laat ik dat idee nou net ook in mijn hoofd hebben.

Ja dat werkt echt super goed.

 

Ik heb deze tl bakken gebruik.

TL montagebalk.

Die zijn even breed als de kast.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Zo net even media gemaakt:

gallery_9555_8916_460136.jpg

 

1. Begonnen met demin water:

gallery_9555_8916_297147.jpg

 

2. Suiker afgewogen:

gallery_9555_8916_275458.jpg

 

3. MS + vitamine toegevoegd.

gallery_9555_8916_327059.jpg

 

4. Hormonen en Conserveermiddel toegevoegd.

gallery_9555_8916_427998.jpg

 

5. Medium toegevoegd:

gallery_9555_8916_644886.jpg

 

6. Old school pH papier gebruikt uit de kit:

gallery_9555_8916_414391.jpg

Ik heb de pH bijgesteld (pH- HPO4).

 

7. Dit heb ik gecontroleerd met behulp van pH meter. Ik zat op een pH 5.1. Misschien dat ik scheel ben maar ja.

Dit heb ik met behulp van pH+ KOH. Bijgesteld tot 5.8

gallery_9555_8916_209762.jpg

 

8. Ik heb de bakjes klaar gezet:

gallery_9555_8916_334017.jpg

 

9. Vervolgens heb ik het medium voor 8 min in de magnetron gedaan.

 

10. Met behulp van een 25 ml pipet heb ik de bakjes gevuld.

gallery_9555_8916_564880.jpg

gallery_9555_8916_749589.jpg

 

11. Bakjes in de snelkookpan gedaan.

gallery_9555_8916_497952.jpg

 

12. 50% van de bakjes gesteriliseerd met UV lamp

gallery_9555_8916_788338.jpg

Share this post


Link to post
Share on other sites

Ziet er veel belovend uit dit.

 

Heb je zeker vaker gedaan :wacko:

 

bedankt voor die tip van de tl's. ik heb jammer genoeg al armatuurtjes van de gamma.

Die gaan ook wel werken, maar die je net liet zien zijn toch geschikter.

 

waarvan ga je kweekjes nemen dan, ik neem aan dat je 1 of meerdere soortjes gaat opkweken.

 

cool dit, cannalogie 1op1

 

:lol:

 

grt low

Share this post


Link to post
Share on other sites
waarvan ga je kweekjes nemen dan, ik neem aan dat je 1 of meerdere soortjes gaat opkweken.

 

Ik heb nu helaas maar twee soortjes tot mijn beschikking. :lol:

NLX en Silver Haze.

Mocht iemand op het forum nog wat exotische soortjes hebben.

 

Zou het super mooi zijn als ik hier wat kleine stukjes van kan krijgen.

Voor TT heb je niet echt veel nodig. :wacko:

 

Je kan me eventueel een PM sturen. Het zou het makkelijkst zijn als we ergen in ZH kunnen afspreken.

Share this post


Link to post
Share on other sites

13. Media 30, 40, 45 en 50 min in de snelkookpan.

gallery_9555_8916_63508.jpg

 

Foutendiscussie:

1. Het medium dat 30 minuten in de snelkookpan heeft gezeten is niet hard geworden. :wacko:

2. Het medium dat 40, 45 en 50 min heeft gekookt wel. :lol:

Share this post


Link to post
Share on other sites
Zou het super mooi zijn als ik hier wat kleine stukjes van kan krijgen.

Voor TT heb je niet echt veel nodig. :lol:

 

Je kan me eventueel een PM sturen.

 

Ik weet niet of het gaat lukken om een stukje weefsel via pm te sturen :wacko:

Share this post


Link to post
Share on other sites
Ik weet niet of het gaat lukken om een stukje weefsel via pm te sturen :wacko:

Daar wordt aan gewerkt.

Volgens mij zit dat in de volgende versie van het Forum :lol: .

Share this post


Link to post
Share on other sites

14. Zo we kunnen beginnen. Alles eerst even opgesteld.

gallery_9555_8916_191559.jpg

 

15. Ik heb eerst de stukjes weefsel klein gesneden.

gallery_9555_8916_159590.jpg

 

16. Weefsel 10 min gewassen in een oplossing van 10% chloor.

17. Vervolgens 30 sec in een 70% alcohol oplossing gewassen.

18. Daarna 3x gespoeld met gesteriliseerd water.

gallery_9555_8916_153845.jpg

Share this post


Link to post
Share on other sites

Ik neem aan dat je gelijk verder bent gegaan met stap 19?

Het weefsel plaatsen in het medium

Of ben ik te snel?

 

Grtz Guesswho?

Share this post


Link to post
Share on other sites

Foto's komen er zo aan. Ben ff flimpje aan het kijken.

 

Was nog best inspannend werkje.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Dat geloof ik graag

Maar het ziet er zeer vakkundig uit zeg!

 

Is de film ook ergens online te bewonderen?

Of te downloaden...

 

Grtz Guesswho?

Share this post


Link to post
Share on other sites

:tu Zo nog ff laatste foto's uploaden.

 

19. Na het wassen heb ik de stukjes gesneden (eventueel Necrose verwijderd).

gallery_9555_8916_232433.jpg

 

20. Vervolgens verschillende onderdelen van de plant in de bakjes gedaan. Hiervoor heb ik wat weefsel gebruikt afkomstig van NLX en Silverhaze moeder.

gallery_9555_8916_216641.jpg

gallery_9555_8916_434053.jpg

 

21. Na 2 uurtjes wassen en snijden 26 bakjes met weefsel als resultaat. Hier moet bij worden vermeld dat het meeste werk in het wassen zit.

Het zou weinig uitmaken of je 26, 100 of 1000 stukjes wast. Het gaat allemaal in 1 grote pot.

gallery_9555_8916_734918.jpg

 

22. Alles vervolgens netjes in de propegator gestopt. Deze heb ik ingesteld op 26 Graden.

De lampen staan op 18 uur 1x30W T5 en 1X30W T8 Lamp.

gallery_9555_8916_244204.jpg

 

En nu komt het wachten B). Ik zal proberen 2x per week een foto te maken.

Zaterdag ga ik nog medium maken van caisson. Hier kan ik wat meer spelen met de verschillende hormonen.

Bovendien kan ik stoffen zoals nicotine toevoegen. Wat volgens de literatuur gunstig is voor onze planten.

Share this post


Link to post
Share on other sites
Is de film ook ergens online te bewonderen?

 

Ik was The Tournament aan het kijken.

Klik B)

 

Maar je bedoeld zeker die film van tisseu culture?

Nee kon hem niet online vinden.

Als het goed werkt zal ik wel een intructie filmpje in het Nederlands maken.

En deze plaatsen.

Share this post


Link to post
Share on other sites
En nu komt het wachten B). Ik zal proberen 2x per week een foto te maken.

En hoeveel weekjes duurt het dan voor er iets herkenbaars ontstaat?

Als het goed werkt zal ik wel een intructie filmpje in het Nederlands maken.

En deze plaatsen.

Nou, als je dat doet, dan ben je nog beter bezig dan je nu al bent :tu

 

EmTee

Share this post


Link to post
Share on other sites
En hoeveel weekjes duurt het dan voor er iets herkenbaars ontstaat?

 

Laatste keer kreeg ik na ongeveer 1 week klompjes Callus (Wondweefsel).

Het is de bedoeling dat hier zoveel mogelijk totipotente cellen in ontstaan (soort stamcellen).

Deze klompjes kan je met behulp van hormonen sturen in hun differentiatie proces.

Voordat ik iets heb wat je kan planten zal ik een week of drie verder zijn.

 

Als het allemaal mee zit. Zal ik daarna een kweekje doen met plantjes uit de Tisseu Culture.

Hoelang het aanslaan van Tissue Culture's duurt weet ik niet.

Maar we zullen zien. B).

Share this post


Link to post
Share on other sites

Duidelijke uitleg zo

Zal de film eens gaan bekijken B)

 

Grtz Guesswho?

Share this post


Link to post
Share on other sites
Guest elmanito

Herinneringen van botanie praktijk komen wanneer ik die foto's weer zie, alleen ik hoop dat je wel gevrijwaard blijft van schimmels, want dat was tijdens de praktijk altijd een ramp als je weer een of andere moron de dekseltjes ging optillen om te kijken hoe het met de klompjes ging. :tu ;)

 

Met welke hormonen ga je mee werken???

 

Namaste B)

Share this post


Link to post
Share on other sites

Goed uitgelegd met mooie foto's om te ondersteunen B)

bedankt voor het sharen

 

greetz sannie

Share this post


Link to post
Share on other sites
Met welke hormonen ga je mee werken???

 

De hormonen waar ik mee ga werken zijn:

1. Auxine

2. Cytokininen

3. Gibberellinezuur

4. Ethyleen

 

 

gallery_9555_9028_13755.jpg

 

In eerste instantie wil ik starten met een power van tien dus 120 testen.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Nog even een TC Flow Chart.

gallery_9555_8916_30415.jpg

 

Helaas is voor Tissue Culture wel een beetje geduld nodig.

We hebben in ieder geval nog geen bakjes met schimmel. B)

Share this post


Link to post
Share on other sites

is er al ontwikkeling in de plantjes?

ik kijk zeker 5x per dag of er nieuwe foto's zijn B),

ik vind dit zéér boeiend

Share this post


Link to post
Share on other sites
Guest
This topic is now closed to further replies.

×
×
  • Create New...