Jump to content
  • sanniesshop-banner.gif.d86ea02547aa126c899b25f607244aaf.gif sanniesseeds instagram

Prince of Wiet

Wil Jij Snel Veel Nakomelingen Hebben Van Jou Favoriete Plant

Recommended Posts

Ik vond dat de topic Weefselkweek? Wel eens nieuw leven ingeblazen mocht worden daarom dat ik dit topic gestart ben.

Ik heb in deze richting gezeten op school(dus weet er wel iets van af). het is een toffe ervaring als je dit kan doen maar alles moet zo goed als steriel zijn. (zal ik later op terug komen.)

ga ik verder op deze topic. En ga de werk wijze gedetaileerd bespreken.

 

Weefselkweek of ook wel in vitro cultuur genoemd.(in vitro is een latijnse benamenig die letterlijk vertaald ‘in glas’ betekent)

Waarom wordt deze techniek toegepast?: voor het ontwikkelen van ziekte vrij plantmateriaal ( dit wil niet zeggen dat ze in de loop van hun levens ja(a)r(en) dit niet kunnen worden.)

Dit is een manier om veel nakomelingen te krijgen met slechts een minimum aan plant materiaal.

 

Wil je deze manier proberen dan moet je heel zorgvuldig te werk gaan. (alles steriel houden)

 

In een bedrijf dat gespecialiseerd is in dit soort vermenigvuldigingen kan men van 1volwassen plant duizenden nakomelingen produceren.

 

En zoveel kost het niet. Het enige wat je nodig hebt is/zijn:

Een bladsteel van bv 5cm (kan je 5 planten uit halen)

Een pincet

Een scalpel

Een snelkooppan

Een aantal inmaak potten.

Voedingsstoffen (weet ik niet presies voor cannabis)

Agar

2 kleine gas branders

bijna zuivere alcohol (om te onsmetten). ethanol

Weegschaal

Gedemineraliseerd water

Agar en de inmaakpotten zijn te vinden bij Brouwland

De andere artikels zijn denk ik wel te vinden bij een goede drogist.

 

Dan als men eenmaal alles heeft gevonden kan men starten.

 

1. Bereiden en sterelisatie van voedingsbodems.

 

Alle nodige stoffen worden afgewogen op een weegschaal. Dan voegen we gedemineraliseerd water toe tot dat we aan 1L zitten. Op het einde stellen we eventueel de pH in. Indien een vaste bodem met agar als stolmiddel wordt bereid, moet de ph zodanig zijn dat de agar voldoende zal opstijven (pH = 5.8) .

Agar lost slecht/ niet op in koud water op de voedingsbodem homogeen te verkrijgen moeten we hem opwarmen op een kookplaat, vuur, ... Let op dat de voedingsbodem niet aanbakt of overkookt!!! dus goed en bijna continu roeren !!! als je ziet dat alles goed is opgelust, gaan we dit verdelen over verschillende bokalen.die worden afgesloten met een deksel en vervolgen 20 min in een snelkookpan geplaats worden. Op ongeveer 121°C bij een overdruk van 1bar.

 

2. Een voorbeeld van benodigde voedingsstoffen voor het vermeerder van de ficus (d.m.v. scheuten) {kon geen ander voorbeeld vinden in men cursus}

 

Murashige & Skoog 4,3666g

Vitamines volgens Nitsch 0,1085g

Suiker 20g

Agar 12g

BAP 0,5mg (=0,0005g)

IBA 1mg (=0,001g)

 

3. Sterelisatie van het primair explantaat.

 

We gebruiken alleen jonge, volledig uitgegroeide bladeren. Sterelisatie er van verloopt als volgt

• Gedurende 5 seconden schudden in ethanol.

• Onderdompelen 15 min. Lang in 15% bleekwater + detergent toevoegen om een betere veochtiging te verkrijgen.

• Na sterelisatie wordt het product verwijderd door spoelen in gedestilleerd, gestereliseerd water.( dit kan men doen door net als de voedingsboden het water in een bokaal 20min in de snelkookpan te plaatsen.

• Deze leggen we dan in een pot die we vooraf hebben ontsmet met alcohol.

 

4. Versnijden en enten van het explantaat.

 

Voor het versnijden van het gebruikte plant materiaal gaan we als volgt te werk:

 We vullen een spuitfles ( ook te vinden bij brouwland onder de rubriek meten/labo) met ethanol.

 We ontsmetten de handen, de wanden en het werkvlak met deze oplossing.

 We stereliseren wat papier door er met een beetje ethanol over te wrijven en het dan in brand te steken !!! LET OP DAT JE JE NIET VERBRAND !!! zorg er ook voor dat het papier zelf niet gaat branden dus aat een beetje ethanol er over wrijven. Als dit gebeurt is leggen we het papier op het werkblad.

 We plaatsen de vooraf bereide en gestereliseerde voedings bodemsaan één zijde van het werkblad.

 Dan nemen we een klein bekertje en doen daarethanol in( dit dient om het scalpel en het pincet te ontsmetten.

 Dan plaatsen we aan onze linker en rechter kant een gasbrander (deze dienen om de lucht rondom u te ontsmetten.

 We ontsmette nvervolgens de uiteinden van het scalpel en het pincet door deze even in het bekertje met ethanol te steken en nadien even door de vlam van een gasbrander te gaan.we ontmette nde pot met het gestereliseerde plantmateriaal nog eens langs de buitenkantdoor met huishoudpapier waarop wat ethanol zit de pot af te wrijven.

 We doe indien u dit heeft een mondmasker aanen ringen en horloges uit. (wordt sterk aangeraden omdat dit voorkomt dat u bacteriën op het gesteriliseerde plantmateriaal blaast).we ontmetten nogmaals de handen.

 We draaien het deksel van de pot met planten zonder aan de binnezijde van het deksel of potrand te komen.

 Met een afgekoelt pinset nemen we de planten ordelijk uit de bokaal en leggen dee op het papier.

 Vervolgens ontsmetten we terug het pincet en scalpel en laten afkoelen.

 De planten in kleine pakjes op het papier leggen van achter naar voor zodat men nooit met de hand of arm over de reeds aanwezige planten komt.

 Nu kan men 1 stennegltje nemen met het pincet het voor je leggen een een stukje van ± 10mm ga zo door tot je er een aantal hebt. De stukjes worden in cultuur gebracht door ze plat (met het snijvlak naar beneden/boven) op een voedingsbodem te legge nen lichtjes aan te drukken (dit moet allemaal met het pincet gebeuren).

 We nemen de te enten pot( pot met daarin de voedings bodem.) , schroeven het deksel los en leggen het omgekeerd optafel zonder aan de binnenzijde of de dekselrand te komen.

 Stereliseer nog maalshet pincet, is dit voldoende afgekoeld (controle in de voedingsbodem) dan kan men het stukje bladstengel vastnemen( met pincet) en terwijl men de pot lichtjes schuin houdt deze in de voedingsbodem duwen.

 Als het stukje stengel in de voedingsbodem steek neem dan de pot en het deksel vast en ge een licht met de rand van de pot en de rad van de deksel door de vlam van een gasbrander.en dan mag u hem toe draaien.

 Als deze toe is zet u hem an de andere kant.

 Ik raad aan om 5 stukjes te snijden dan het pincet te stereliseren dan de 5 stukjes in de voedingsbodem te steken en dan nogmaals het scalpel en het pincet te stereliseren. Zo gaat u dan verder tot u het gewenste aantal enten hebt.

 Wat u kan doen op ruimte te besparen is een aantal stengel stukjes per pot zetten.

 

Als u dit allemaal gedaan heeft rest er u nog maar 2 dingen te doen:

 

1) Zorgen dat u een kweekkamer heeft met daarin een paar tl lampen (deze moeten een lichtspecrum uitzenden dat grotendeeels op dat van de zon lijkt.) en een termperatuur tussen de 20-24°C (deze tl lampen moeten 12-16uur per dag branden afhankelijk van de soort.)

 

2) Wachten totdat deze planten groot genoeg zijn om nadien in aarde, ... verder op te kweken.

 

Dit was de werkwijze, moesten er nog vragen zijn stel ze gerust (niet die van de samenstelling van de voedingsbodem voor cannabis wand die weet ik zelf ook niet) :verrygood

 

Reacties en eventueel nog tip zijn altijd welkom. :) ;)

 

Prince of Wiet

Edited by Prince of Wiet

Share this post


Link to post
Share on other sites

@Blowmonkey: Wel als je maar een paar stekjes wil hebben maar maar als je er een hele hoop wilt hebben is deze oplossing toch veel voordeliger omdat je minder planten materiaal nodig hebt voor vele meer nakomelingen.

 

@ iedereen: zodra ik mijn hok af heb en een voldoende grote plant heb ga ik proberen uit te zoeken welke stoffen nodig zijn en welke hoeveelheid voor een goede voedingsbodem.

Mocht iemand dit al weten ma hij/zij dit zeker vermelden.

 

reacties en eventueel nog tips zijn altijd welkom :verrygood

 

Prince of Wiet

Share this post


Link to post
Share on other sites

Lekker doorgaan p.o.w

Ik vind het zeker mooi om te lezen, is weer eens wat anders dan het standaard stekken maken. :verrygood

 

Citroax

Share this post


Link to post
Share on other sites

Jo

 

dit is materiaal voor stekkenboere :verrygood

zo zullen de meeste snel opkijken en denken, ho nouw die gaat keurig te werk, maar hier moet een voorbeeld aan genomen worden.

die invitro teelt is wel wat ingewikeld( voor de hardcore hobbisten) maar zo zie je maar dat er bij het snijden van stekken best wat hygiene gemoeid moet gaan,( moest je je moederplanten gezond en zonder besmeting willen houden)

 

dat tabak mozaiêk virus (TMV)zit niet voor niets in een massa stekken, allemaal stekken die van miss verschillende moederplanten met het zelfde mes na elkaar worden gestekt en zo besmet geraken.

Bij het snijden van goede stekken, gebruikt men per plant ook best maar 1 maal het zelfde mes dat gesteriliseerd is voor gebruik ;)

 

wel leuke info prince

 

mazzels

Share this post


Link to post
Share on other sites

Idd zoals Tuinkabouter2003 al zei bij dit soort vermeerdering is hygiene van groot belang omdat er anders in plaats van een plant schimmels en virussen zouden kunnen groeien (heb het vaak genoeg gezien op school).

 

Maar omdat het voor hobby is en niet voor professioneel is is na elke keer alles stereliseren een klein beetje overbodig als je het doet na max 5 keerr is het nog ok.

 

Natuurlijk als iemand dit wil proberen hij/zij mag dit altijd doen (na elke snede je materiaal terug stereliseren).

 

Maar let er wel op dat als je dit doet je wel let op de hygiëne rondom je en op de hygiëne van je materiaal.

 

Reacties en eventueel tip zijn altijd welkom.

 

Prince of Wiet

Share this post


Link to post
Share on other sites

Interessant!

 

Houd ons op de hoogte!

 

Priest

Share this post


Link to post
Share on other sites

Heej Prince of Wiet!

 

Ik heb wat gezocht naar dat weefselkweek-gebeuren, en ik ben er achter gekomen dat die voedingsbodem agar-agar uit 3 essentiele componenten bestaat:

 

-Goede voedingsstoffen, met de juiste N-P-K vehouding. Dit is nodig om goede groei te kunnen bevorderen.

 

-Dat wat de fotosynthese uit handen van het stekje neemt. Er is namelijk nooit genoeg CO2 aanwezig om te zorgen dat er ook echt een stekje groeit. Vandaar dat ook de fotosythese uit handen word genomen bij weeselkweek.(Dit is de kern van het hele weeselkweken trouwens)

 

-Hormonen!! Deze hormonen bevorderen afzonderlijk het groeien, of het wortelen. Zo kun je bijvoorbeeld eerst je stekje laten groeien, en deze nog vele malen in stukken delen, voordat ze in een wortel agar-agar worden gezet.

 

Voor goede voedingsstoffen zou je kunnen proberen een vorm van Hydro voedingsstoffen in de agar-agar op te slaan. Voor wortelhormonen wat wortelvloeistof, of root accelerator.

Nu het grote probleem: De fotosynthese uit handen nemen. Ik heb geen idee hoe dit zou kunnen, maar op het moment is treelover bezig met een gewoon buitenkweektopic, waar de planten worden ge-injecteerd met xylitol, en dextrose met het water mee krijgen. Het wachten is op de uitslag daarvan. Misschien worden wij er wijzer uit.

 

Hier de link : Xylitol topic

 

 

Succes ermee!

 

Nator

Share this post


Link to post
Share on other sites

love this topic!!

 

Vraag me af of de Agar te vervangen is door bv: gellan gum(misschien aangenamere eigenschappen)

 

 

 

cheerio

Share this post


Link to post
Share on other sites

Ik denk dat voor wietplanten een aangenamere samenstelling van je medium nodig is, aangezien een ficus een totaal ander soort plant is, kun je denk ik het beste kijken naar iets dat dichter bij de wietplant in groeifase in de buurt komt, bijv. Arabidopsis thaliana ofwel aardbijenplant :smoke Protocol

Dit is overigens een protocol voor een suspentie cultuur (met een vloeibaar medium) iets dat in mijn ogen net iets minder omslachtig is als vele schaaltjes enten :blink: Zo simpel kan het zijn..

Om even in te haken op de vraag of Agar te vervangen is, Agar is onvervangbaar hea..in de biologie in de chemie en in de Moleculaire biologie. Niets mis mee, geen gevaren en in een hand omdraai te bestellen :wOOt

De post daarvoor: Fotysynthese kunnen we de plant niet uit handen nemen, het is het proces waar de plant energie uit wint. Zonder fotosynthese geen, of iedergeval minder energie en dus geen, tot minder ontwikkeling. Het gebruik van Hormonen dat je noemt is wel van eesentieel belang bij het aanlaten slaan van de stek die dmv weefsel cultuur gemaakt is. Je kunt bijvoorbeeld door een sproeibeurt met het plant-eigen hormoon auxine je planten vele malen beter en sneller in je medium laten wortelen. Dit is iets dat met weefsel kweek gestekte planten nog wel eens erg wegen wil vallen zonder het gebruik van hormomen.. Ik lijk het topic wel te stelen joh :wave:

 

Laters, Snowie

Share this post


Link to post
Share on other sites

Ik heb een tijdje geleden een stolmiddel gevonden dat niet zo snel beschimmeld zoals agar nl maizena

en het is ook een stuk goedkoper binnenkort ga dit proberen (als mijn plant groot genoeg is om takjes vanaf te nemen)

 

Zal jullie op de hoogte houden.

 

greetz

 

Prince of Wiet

Share this post


Link to post
Share on other sites

Mooi topic :nerd

Maar ik denk dat ik het bij zaad hou ;)

 

Veel suc6 verder met het uitcijferen van je voedingsbodem :o

 

Gr. GaNjaMan

Share this post


Link to post
Share on other sites

Een groot voordeel van deze IV manier is dat je van letterlijk iedere plant een "micro-stek" kunt nemen en deze letterlijk maanden of jarenlang bewaren. Op deze manier is het dus goed mogelijk om effecienter te breeden door het neerzetten van veel grotere hoeveelheiden planten. Door de micro-stekken in de koelkast te bewaren zullen ze slechts enkele mm's per jaar groeien omdat de stofwisseling vrijwel stilgezet wordt door de afwezigheid van licht in combinatie met de lage temperatuur. Zij zullen enige voeding om in leven te blijven uit de agar halen maar aangezien die licht bemest is zullen ze er spaarzaam mee om gaan.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Hey iedereen ik ga in 2008 deze methode uitproberen maar ik moet aalleen nog even zoeken naar een goede meststofverhouding om in het mengsel van agar te doen.

Moesten jullie een goede verhouding weten laat het me weten. ;)

Zodra ik hier aan begin laat ik jullie het weten en plaats ik een uitgereid verslagje :bier

 

Merry X-mas

 

Prince of Wiet

Share this post


Link to post
Share on other sites

Ik zou je medium niet zelf samen stellen.. dit daar het uit zowel de micro als macro nutriënten dient te bestaan.. Nadeel is dus dat macro nutriënten in minuscule hoeveelheden toegevoegd moeten worden. Een goed medium om de blad- (ik zou persoonlijk namelijk voor een vierkante cm blad gaan als stek materiaal, ivm de diffrentiatie tot, stam wortels en blad..) cultivar (zo heet een stek officieel, niet zelf bedacht :verrygood) op te kweken..

Een mooi medium dat ontwikkeld is voor een snelle ontwikkeling van stekjes van Nicotinia Tabacum ofwel de tabaks plant is waarschijnlijk goed te gebruiken. Dit medium heet het MS-medium naar de bedenkers Murisaghe en Sgoog. Het is wel zo dat hierin de voedings concentraties relatief hoog zijn, daarom bestaat er voor de snelle ontwikkeling van Arabidopsis Thaliana (aardbei) stekken een 50% versie van het medium. En aangezien de wietplant qua blad, en vorm dichter bij de aarbei licht qua voedings behoeften is dit mogelijk geschikter.

Wanneer je agar weet te beschimmelen werk je gewoon weg niet steriel genoeg, dat is namelijk wel een van de vereisten van het weefsel kweken, de schimmel doet het altijd op je voedingsbodem tenzij je fungiciden toevoegd wat weer slecht voor je stekken is.. Gewoon schooon werken en zorgen dat die schimmel sporen niet in je cultuur vat of reageerbuis of petrischaal of wat dan ook komen.. heel veel succes iedergeval en zet em op!! Als je nog MS- medium wil bestellen laat t dan maar even weten, ik kan wel wat regelen.

 

Groeten, Snowie

Share this post


Link to post
Share on other sites

Agar Agar is in principe al voldoende bemest voor je stekjes hoor, om ze een tijdje te laten overleven... Zeg een jaartje...

 

Wil je langer, dan heb je pech, bijmesten is lastig en zal waarschijnlijk niet zo makkelijk lukken.

 

Kees.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Uhm.. agar agar is niets.. behalve de onvertakte polysacharide.. Tenminste wanneer je de goede zuivere agar van de Life Science leveranciers hebt.. Daarnaast is het zo dat je wietplant of stek want die je wilt maken de opdracht moet de krijgen om wortel te maken, hiervoor zijn hormonen nodig. Daarnaast heeft je plantje veel meer nodig dan alleen suiker, de voeding.. hij heeft immers meer nodig NPK en dan nog de anderen die ook tot tekorten kunnen leiden de magnesium enzo.. ennuh een plant een jaar op agar laten staan? T gaat volgens mij om het stekken hea.. en niet om het groot brengen van de plant..

 

Laters, Snowie

 

P.S. Bedacht me net dat zeggen dat Agar-agar de voeding al bevat net zoiets is als zeggen dat de steenwolblokjes die voeding al zijn. De agar is strikt het bindmiddel voor je voedings bodem.

Share this post


Link to post
Share on other sites

Ik heb dit idee al uitgeprobeerd en de resultaten zijn miniem.

 

Ik heb het in 2 potjes geprobeerd en in het ene potje had ik na n week n mooie collectie van schimmels (weet dat dit door verkeerd/ te weinig ontsmetten is, maar ik had alles volgens de uitleg gedaan - bad luck waarschijnlijk).

 

In het andere potje geen schimmel, maar de 'stekjes' zijn gewoon langzaam uitgestorven.

 

Ik weet niet wat ik verkeerd deed, maar heb alles volgens "the book" gedaan.

 

Ik wil dus zeggen: als je niets van deze dingen kent en het voor het eerst probeert: doe geen moeite :D

 

Maar het was wel leuk om laborantje te spelen :lol:

Share this post


Link to post
Share on other sites

Er moesten waarschijnlijk om de wortel ontwikkeling en de scheut ontwikkeling te stimuleren een groeiregulerende stof (hormoon) aan het medium toegevoegd worden. Iets dat normaal ook gedaan word bij weefsel kweken. Ik zal binnenkort wel even een paar grametjes MS medium en wat IAA mee nemen uit het lab, dan weet ik cker dat betere resultaten haalbaar moeten zijn.. Stel je eens voor, een prefab reageerbuisje waar je je (mini) stek direct in kunt zetten ;)

 

Laters, Snowie

Share this post


Link to post
Share on other sites

Dus als ik rooting gel of stekpoeder in mijn medium zou gedaan hebben zou het moeten gelukt zijn?

Share this post


Link to post
Share on other sites

hey, van die voedingstoffen ken ik het meeste niet, als je een voedingsamenstelling hebt voor cannabis kunt u dan duidelijk uitleggen wat het precies is en waar je het kan vinden?

een wietplant heeft alle voedingstoffen in zig, kan je gewoon geen kompost van weedblaanderen en afval gebruiken voor die bodem?

dank bij voorbaat

Share this post


Link to post
Share on other sites

Janleuri, Zou je zo vriendelijk willen zijn om je eigen even voor te stellen in de "Wie is Wie" sectie van het forum, zoals je is verzocht in je "Welkomsbericht"

Share this post


Link to post
Share on other sites

was dat verplicht? ik blijf eerlijk gezegt liever anoniem, niet dat ik iets te verbergen heb ofzo.

 

greetzz

 

 

Spelregels

Share this post


Link to post
Share on other sites

Join the conversation

You can post now and register later. If you have an account, sign in now to post with your account.

Guest
Reply to this topic...

×   Pasted as rich text.   Paste as plain text instead

  Only 75 emoji are allowed.

×   Your link has been automatically embedded.   Display as a link instead

×   Your previous content has been restored.   Clear editor

×   You cannot paste images directly. Upload or insert images from URL.


×
×
  • Create New...